疏水相互作用色谱（HIC）的驱动力是非极性固定相与在高盐浓度流动相作用下暴露的分子疏水性区域之间的非极性相互作用。流动相中的离液盐会显著改变溶液中分析物周围的水合模式，迫使疏水区域重组，并与弱非极性固定相发生不同程度的相互作用。通过降低流动相中的盐浓度，分析物通常按照从亲水性最强到疏水性最强的顺序洗脱。对于强结合物质，可在流动相中使用低比例的有机溶剂以促进洗脱。
疏水相互作用色谱（HIC）是一种基于非极性相互作用的分离技术，其原理在于高盐浓度流动相暴露出的分子疏水区域与非极性固定相之间的作用。流动相中的离液盐能显著改变分析物在溶液中的水合状态，促使疏水区域发生结构重组，并与弱非极性固定相产生差异化的相互作用。通过逐步降低流动相盐浓度，分析物通常按亲水性由强到弱的顺序被洗脱；对于结合较强的物质，可添加低比例有机溶剂以辅助洗脱。
疏水相互作用色谱通常被视为生物制品分析中的非变性分离技术，能较好地维持蛋白质、抗体及核酸的三级与四级结构。该技术广泛应用于蛋白质分离纯化、DNA/RNA异构体分析、AAV的病毒清除、单抗及双特异性抗体的鉴定，以及ADC的分析等领域。
